- Стратегии замены генов при раке(PubMed)
Автор:Дж. А. Рот
Аннотация:Стратегия инактивации или замены генов, вызывающих рак, аналогична классической концепции генной терапии для замены дефектных или нефункционирующих генов. Семейства генов, участвующих в канцерогенезе, включают доминантные онкогены и гены-супрессоры опухолей. Региональное введение вирусных векторов, экспрессирующих p53 дикого типа и антисмысловой K-ras, предотвращает рост опухолей со специфическими генетическими повреждениями в моделях ортотопических опухолей и опосредует регрессию крупных установленных опухолей. Эти исследования обосновывают новый клинический протокол, недавно одобренный Консультативным комитетом по рекомбинантной ДНК Национального института здравоохранения США (NIH) и Федеральным управлением по лекарственным средствам (FDA) для замены дефектного гена p53 внутриопухолевой инъекцией рекомбинантного ретровируса, экспрессирующего нормальный p53. и инактивировать мутантный K-ras путем экспрессии антисмысловой мРНК K-ras. Если эти агенты эффективны, их отсутствие токсичности может обеспечить достаточно высокий терапевтический индекс, чтобы их можно было использовать в качестве адъюванта к хирургии для лечения пациентов с более ранними стадиями рака или в качестве профилактики вторичного первичного рака у лиц с генетическими аномалиями в предраковых состояниях. поражения. Хотя необходимо провести много исследований, возможность нацеливания на специфические гены с высоким терапевтическим индексом делает эту область многообещающей для исследований.
2. Стабильная замена гена в ячмене путем направленной индукции двухцепочечного разрыва(PubMed)
Автор:Коити Ватанабэ, Ульрике Брейер, Гётц Хензель, Йохен Кумлен, Инго Шуберт, Бернд Рейсс.
Аннотация: Нацеливание на гены становится важным инструментом точной инженерии генома растений. Во время замены гена, варианта нацеливания на ген, трансформированная ДНК интегрируется в геном путем гомологичной рекомбинации (HR) для замены резидентных последовательностей. Мы проанализировали нацеливание генов в ячмене (Hordeum vulgare) с использованием модельной системы, основанной на индукции двухцепочечного разрыва (DSB) мегануклеазой I-SceI и трансгенного искусственного локуса-мишени. В полученных нами растениях донорная конструкция была вставлена в целевой локус путем гомологически направленной интеграции ДНК как минимум в два трансформанта, полученных в одном эксперименте, и стабильно наследовалась как один менделевский признак. Оба события были произведены односторонней интеграцией. Наши данные свидетельствуют о том, что замена гена может быть достигнута в ячмене с частотой, подходящей для рутинного применения. Использование кодон-оптимизированной нуклеазы и ко-перенос гена нуклеазы вместе с донорной конструкцией, вероятно, являются важными компонентами для эффективного нацеливания генов. Такой подход, использующий недавно разработанные синтетические нуклеазы/никазы, которые позволяют индуцировать DSB почти в любой последовательности интересующего генома, закладывает основу для точной инженерии генома в качестве рутинного инструмента даже для важных сельскохозяйственных культур, таких как ячмень.
